光照對水中葉綠素含量檢測的影響，是一項至關(guān)重要卻又常被忽視的技術(shù)前提。其實驗結(jié)果的精確性與可靠性，不僅取決于儀器本身的精度，更與光照這一貫穿采樣、處理、儲存乃至檢測全過程的變量密切相關(guān)。不當(dāng)?shù)墓庹湛刂疲阋粤钭罹艿臏y量偏離真實值，其影響機(jī)制是多層次且深刻的。

目前，對戶外水質(zhì)葉綠素含量檢測，比較行之有效的設(shè)備是便攜式葉綠素測定儀，一機(jī)多能，可以檢測包括葉綠素在內(nèi)的數(shù)十種水質(zhì)參數(shù)。

在樣品采集與初始處理階段，光照條件直接作用于水體中浮游植物的生理狀態(tài)。葉綠素a作為光合作用的核心色素，其細(xì)胞內(nèi)含量并非恒定不變，而是隨光照強度發(fā)生動態(tài)調(diào)整。在強光環(huán)境下，藻類細(xì)胞可能啟動“光適應(yīng)”機(jī)制，單位細(xì)胞內(nèi)的葉綠素a含量會暫時性降低，以規(guī)避光損傷；反之，在弱光條件下，細(xì)胞則可能合成更多葉綠素以捕獲光能。若采樣過程未對光照進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化控制（例如，統(tǒng)一在特定光照時段或使用避光采樣器），所獲樣品中葉綠素的初始濃度即已失真，不能代表水體的真實平均生物量。此外，樣品暴露于強光下，會顯著加速藻類細(xì)胞的代謝乃至死亡裂解，導(dǎo)致葉綠素在測定前便開始降解。

其次，也是最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)在于，光照會直接引發(fā)樣品中葉綠素分子的光化學(xué)降解。葉綠素是一種對光極其敏感的光敏分子，尤其在富含氧的水體環(huán)境中。當(dāng)樣品在運輸、保存或前處理過程中受到持續(xù)光照，特別是紫外及高強度可見光照射時，葉綠素分子的卟啉結(jié)構(gòu)會吸收光子能量，發(fā)生不可逆的光氧化反應(yīng)。這個過程導(dǎo)致葉綠素a降解為無熒光或無特征吸光度的產(chǎn)物，從而使后續(xù)檢測的測定值系統(tǒng)性偏低。這種降解速率受溫度、溶解氧和光照強度的共同影響，在夏季高溫、高氧、強光條件下尤為劇烈。

在具體的檢測方法層面，光照的干擾以不同形式存在。若采用熒光分光光度法，該方法的原理即是利用特定波長的光激發(fā)葉綠素a產(chǎn)生熒光。然而，若樣品在提取后或測定前經(jīng)歷不當(dāng)光照，目標(biāo)色素已部分降解，其熒光強度將直接減弱，導(dǎo)致測定結(jié)果顯著偏低。更復(fù)雜的是，某些葉綠素的降解中間產(chǎn)物可能產(chǎn)生背景熒光，干擾特異性測定。若采用高效液相色譜法，雖然分離能力強，但樣品前處理過程中的光照降解同樣會使進(jìn)入色譜柱的目標(biāo)物峰值面積減小。

即便是現(xiàn)場使用的活體熒光儀，其測定值反映的是“原位”光照歷史下藻類的表觀葉綠素含量，其讀數(shù)本身就包含了藻類光適應(yīng)狀態(tài)的信息，且儀器激發(fā)光源本身也可能在瞬時測量中對敏感藻種造成光抑制效應(yīng)，影響連續(xù)監(jiān)測數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性。

因此，嚴(yán)謹(jǐn)?shù)臋z測規(guī)程必須將光照控制置于核心地位。這要求：采樣時應(yīng)使用深色避光材料制成的樣品瓶，并盡快注入、充滿、密封；樣品在運輸與保存過程中須全程避光，并置于低溫環(huán)境；實驗室提取操作應(yīng)在柔光或暗室條件下進(jìn)行，使用棕色容量瓶，并盡可能縮短處理時間；對于儀器，需定期校準(zhǔn)，并確保檢測室避光良好。